??產品基礎信息
- 貨號:78G180
- 英文名:Green Retrobeads™ IX (100 µl)
- 中文名:綠色逆向示蹤熒光微粒(100微升)
- 品牌:Lumafluor
- 規(guī)格:100 µl(濃縮懸浮液,溶于蒸餾水)
- 適用領域:神經科學、發(fā)育生物學、藥物遞送研究、免疫組織化學等
??產品詳細介紹
1. 技術原理與設計理念
Green Retrobeads™ IX (100 µl)是Lumafluor公司研發(fā)的逆向示蹤熒光微粒,基于乳膠微球技術,通過熒光標記實現神經元或細胞的逆向示蹤。其核心設計理念是“精準定位,長期穩(wěn)定",通過微球表面修飾的熒光染料(綠色熒光素)和物理化學特性,可在活體或固定組織中長期保留標記信號,且不干擾生物活性。
2. 核心功能與應用場景
- 神經回路追蹤:標記神經元投射路徑,適用于哺乳動物和靈長類動物模型。例如,研究視覺皮層到海馬體的神經連接。
- 藥物遞送驗證:作為生物活性分子載體,追蹤藥物在組織內的分布與代謝。
- 發(fā)育生物學研究:觀察胚胎期神經元遷移與分化過程。
- 免疫組化聯(lián)合實驗:與抗體標記技術結合,實現多維度細胞定位。
3. 產品形態(tài)與操作流程
- 形態(tài):濃縮液形式,含乳膠微球懸浮于蒸餾水,需冷藏保存(4°C)。
- 操作流程:
1. 稀釋:綠色微球建議原液使用,紅色微球可1:4稀釋(需驗證實驗條件)。
2. 注射:通過壓力注射(如漢密爾頓注射器)或微量玻璃電極(30-50 μm針頭),單次注射量0.1-0.3 µl。
3. 固定與切片:4%多聚甲醛固定,冰凍切片后二甲苯透明,封片劑需避光(如Fluoromount)。
??核心優(yōu)勢詳細介紹
1. 高度精準的注射與擴散控制
- 低擴散性:注射后擴散范圍<1 mm,適合精細神經環(huán)路研究。
- 多點注射支持:大范圍標記需多點注射,避免信號重疊。
2. 超長穩(wěn)定性與生物相容性
- 存活時間:活體標記最長14個月,細胞標記長期性。
- 無毒性:未發(fā)現對神經元或活體組織的毒性效應。
3. 兼容性與多功能性
- 技術兼容:與順行示蹤劑(如HRP)、原位雜交、免疫熒光染色無縫聯(lián)用。
- 多物種適用:從無脊椎動物到非人靈長類均有效。
4. 低背景熒光與高信噪比
- 抗光漂白:長期觀察(>1年)無明顯信號衰減。
- 自發(fā)熒光抑制:綠色微球需薄切片(30 μm)和幼年動物模型以降低背景干擾。
5. 嚴格的品控與文獻驗證
- 有效性認證:經數百篇論文驗證,無替代品可達到同等效果。
- 標準化生產:每批次通過熒光強度、粒徑分布等質檢。
?常見疑問與解答
Q1:綠色微球是否需要稀釋?
A:綠色微球建議原液使用,紅色微球可1:4稀釋(需預實驗驗證)。稀釋需使用蒸餾水或標準鹽溶液(如NaCl/KCl)。
Q2:儲存條件是什么?能否冷凍?
A:需4°C冷藏,避免蒸發(fā);嚴禁冷凍,否則微球失效。開封后需密封保存,建議1年內用完。
Q3:如何選擇注射體積與針頭?
A:
- 常規(guī)逆向示蹤:0.1-0.3 µl(大口徑針頭)。
- 局部精細標記:30-50 nl(30-50 μm玻璃電極)。
Q4:固定時能否使用戊二醛?
A:不能!戊二醛會引發(fā)組織自發(fā)熒光,導致綠色微球信號不可見。推薦4%多聚甲醛固定。
Q5:顯微鏡觀察有何要求?
A:
- 濾光片:綠色微球適配寬波段熒光素濾光片(窄帶背景高)。
- 物鏡:推薦油鏡(NA≥0.4),低倍鏡(4×/10×)難以觀察。
Q6:標記信號會隨時間褪色嗎?
A:在避光條件下,標記可穩(wěn)定1年以上,但背景熒光可能增強。建議及時觀察。
Q7:是否支持活體示蹤?
A:是的!微球對活細胞無毒,可動態(tài)觀察神經元活動。
Q8:如何減少組織自發(fā)熒光?
A:
- 使用幼年動物(組織背景低)。
- 切片厚度≤30 μm。
- 封片后立即觀察。
Q9:能否用于冷凍切片?
A:可以,但需注意:
- 切片收集于PBS,明膠包被載玻片。
- 風干后二甲苯透明1分鐘,避光封片。
Q10:是否提供技術支持?
A:Lumafluor中國區(qū)代理(上海起發(fā))提供實驗方案優(yōu)化與售后支持。
更多產品信息,請聯(lián)系中國區(qū)域代理商:上海起發(fā)實驗試劑有限公司
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